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上海通蔚生物選擇人ELISA試劑盒從哪些方面來(lái)
更新時(shí)間:2022-05-26   點(diǎn)擊次數:1720次
  上海通蔚生物選擇人ELISA試劑盒從哪些方面來(lái),由于人elisa試劑盒有著(zhù)準確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大師生朋友的喜愛(ài)。而現試劑盒種類(lèi)頗多,產(chǎn)品的選擇成為了實(shí)驗前的重點(diǎn)事項。那么如何選擇合適的elisa試劑盒呢?
 
  一、檢測方式
 
  如今檢測Elisa試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進(jìn)行選擇。一般Elisa檢測的是酶促反應的可溶性產(chǎn)物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過(guò)分光光度計進(jìn)行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外Elisa結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
 
  二、實(shí)驗類(lèi)型
 
  雖然有多種類(lèi)型,不過(guò)它們都有一個(gè)共同特點(diǎn),就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。in-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)elispot是兩種特殊的類(lèi)型,in-cell Elisa需要將微孔板中培養的細胞進(jìn)行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。elispot有點(diǎn)像蛋白印跡western blot,先在帶膜的微孔板中培養細胞,然后在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點(diǎn)。此外,我們還需要根據自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗。
 
  三、抗體類(lèi)型
 
  單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于Elisa檢測,實(shí)際上有時(shí)候二者結合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
 
  四、交叉反應
 
  如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應就會(huì )影響整個(gè)實(shí)驗的特異性。其中抗體來(lái)源所帶來(lái)的兼容性就是交叉反應的一個(gè)因素。盡管現在購買(mǎi)源自zhi定動(dòng)物的抗體越來(lái)越容易,我們仍有必要確認一下是否會(huì )產(chǎn)生交叉反應的問(wèn)題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測時(shí),檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測用二抗與捕獲抗體結合,實(shí)驗特異性就會(huì )大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來(lái)避免上述問(wèn)題。
 
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